Какие анализы нужно сдать для выявления лямблиоза?

Лямблиоз – это паразитарная инфекция, которую провоцирует простейший микроорганизм Lamblia intestinalis (Giardia Lamblia). Заболевание протекает как в латентной бессимптомной форме, так и в форме ясно выраженных клинических признаков, как правило, в виде диспептического синдрома кишечника. Ниже мы поговорим о том, как сдать анализ на лямблии.

Что такое лямблии

Возбудитель заболевания хорошо известен и изучен. В человеческом организме лямблии существуют в двух формах:

• вегетативной (трофозоиты);
• цистной.

Трофозоиты (вегетативные формы лямблий) паразитируют в тонком кишечнике, но мигрируя в толстую кишку превращаются в цисты(споры), которые вместе с каловыми массами, выходят во внешнюю среду. Лямблии в виде цист могут долгое время сохранять свои жизненные силы в ожидании благоприятных условий. Попав в кишечник человека, цисты превращаются в трофозоиты, прикрепляясь к слизистой оболочке кишечника и питаясь таким способом. Жизненный цикл трофозоитов – 40 дней, но само заболевание может протекать очень длительно, а иногда принимать и хроническую форму, поскольку постоянно происходит реинвазия(самозаражение) лямблиями. Вследствие постоянного существования этих простейших в организме развивается синдром хронической эндогенной интоксикации. В сочетании со снижением функций иммунной системы это может привести к нарушениям в работе всех органов и систем организма.

Заражение происходит фекально – оральным путем только от инфицированного лямблиями человека. Лямблии, паразитирующие в грызунах, не являются опасными для человека.

Как проводится диагностика лямблиоза

Клинический полиформизм симптомов при лямблиозе, а также его бессимптомное течение в некоторых случаях, требуют обязательного лабораторного подтверждения диагноза. Материалом для исследований служит:

• кал;
• кровь;
• дуоденальная жидкость.

Анализы на лямблий включают в себя:

• исследование кала;
• исследование крови;
• исследование дуоденальной жидкости.

В дуоденальном соке обнаруживаются только трофозоиты, в каловых массах – только цисты, в жидких неоформленных или полуоформленных фекалиях – трофозоиты и цисты. В крови обнаруживаются антитела лямблий, что достоверно говорит об их присутствии в организме.

Самым простым и доступным методом исследования для диагностики лямблиоза является копрологическое исследование кала или копрограмма.

Анализ кала на лямблии

Анализ кала на лямблий является классическим методом исследования. Суть метода заключается в исследовании под микроскопом теплого свежего кала. Это обязательное условие для выявления живых лямблий, поскольку их можно обнаружить только в таком кале. При проведении исследования следует помнить, что цисты в кале не всегда можно обнаружить. Но это совсем не значит, что их там нет. Просто выделение цист с калом имеет непостоянный характер. Иногда они выделяются, а иногда этот процесс приостанавливается. Поэтому необходимо проводить повторное копрологическое исследование кала или дополнить данный анализ другими методами исследования. Если в каловых массах были обнаружены цисты лямблий, то тест является положительным. Положительный анализ кала не бывает ложным, а вот отрицательный результат очень часто бывает ложным.

Анализ кала на лямблии считается вполне информативным методом исследования, но только при правильном сборе биологического материала (кала). Основная проблема при сдаче кала на лямблии состоит в том, что биоматериал (кал) должен быть собран сразу же после дефекации. Он должен быть свежим и еще теплым. Другими словами, от сбора кала до его исследования должно пройти от 20 минут, но не позднее двух часов. Вечерний образец кала можно поместить в холодильник, но информативность такого образца снижается. Двухчасовой образец кала предпочтительней, поскольку в нем паразиты находятся в своей живой активной форме.

Только в таком материале можно обнаружить лямблий в вегетативной форме, то есть они находятся в своем естественном состоянии: подвижные, со жгутиками. Лаборанту не составит много труда обнаружить их в такой форме. Однако через определенное время эти простейшие паразиты «понимают» что с их комфортным существованием в кишечнике произошли какие-то изменения. Видимо меняется температура кала, его кислотность и влажность на которую паразиты реагируют. Это заставляет их переходить в форму цист, в которой они способны пережить неблагополучные условия окружающей среды. Живые лямблии перестают двигаться, теряют жгутики, покрываются защитной оболочкой, как бы впадают в спячку и консервируются. В таком состоянии они могут находиться достаточно долгое время. Но даже в таком состоянии они хорошо наблюдаются под микроскопом, поскольку никуда не исчезают. Поэтому кал, сохраненный в холодильнике, также годиться для исследования. Просто его информативность снижается, но полностью не исчезает.

Перед сдачей анализа кала в течение недели следует отказаться от приема лекарственных антипротозойных средств, сорбентов, слабительных препаратов, а также не делать клизмы. Кал берут утром сразу же после дефекации из разных мест: сверху, снизу и изнутри. Взятый материал помещают одноразовой ложечкой в чистый и просторный контейнер.

Позволяется длительное хранение взятого кала до 2-х дней при условии помещения образца в специальную консервирующую жидкость Турдыева. Вероятность обнаружения паразитов возрастает, если кал развести консервантом в соотношении 1 к 3. Это позволяет сохранить паразитов в их естественном живом виде до одного месяца. К тому же консервирующий раствор дает возможность выявить лямблии, не нарушая их строения, даже при их минимальном содержании в каловых массах.

Анализ крови на антитела

Анализ крови на лямблии сдают не для того, чтобы там обнаружить эти микроскопические организмы. В крови лямблий нет и быть не может. Их место обитания желудочно – кишечный тракт: тонкий кишечник, толстый кишечник или же желчные протоки печени. Доказательством присутствия лямблий в организме являются особые антитела в крови, которые продуцируются иммунной системой после получения сигнала об появления чужеродных веществ в организме. Несмотря на то, что анализ кала до сих пор используется в медицине и иногда является достаточно информативным, но в настоящее время для идентификации этого простейшего паразита все чаще применяют иммунологические методы исследования.

На сегодняшний день это самые достоверные способы выявления простейших. На протяжении 10-ти дней капля крови подвергается иммуноферментному исследованию, в ходе которого устанавливаются отрицательные пробы для вычисления диагностической плотности.

Еще несколько лет назад диагностика лямблиоза была трудной задачей, намного трудней, чем его лечение. Но благодаря развитию биохимии диагностика лямблиоза значительно упростилась.

Иммуноферментный анализ крови

В основе ИФА – теста находится иммунный метод диагностики антиген – антитело. Хорошо известно, что наша иммунная система реагирует на чужеродные вещества в организме (вирусы, микробы, паразиты, патогенные грибы). В результате этой реакции формируются антитела, которые должны нейтрализовать «незваных гостей». В результате образуется комплекс антиген –антитело. Обнаружив в крови с помощью данной тест – системы специфические антитела (белки, которые выделяются иммунной системой на появление в организме антигенов паразитов), можно с уверенностью диагностировать наличие лямблий, даже при полном отсутствии симптомов.  При выявлении заболевания тест обнаруживает в крови иммуноглобулины и антитела типа IgM.

Для выявления антител используют сыворотку крови, в которой обнаруживаются специфические антитела класса IgM (10-14-е сутки от начала инвазии), а затем и антитела класса IgA и IgG. Спустя две недели после заражения в крови больного обнаруживаются антитела класса IgM, после чего появляются и другие IgG и IgA класса, которые на высоком уровне сохраняются в организме на всех стадиях лямблиоза и даже после его полного излечения. Из крови антитела исчезают полностью только через 2-6 месяцев. По этой причине не всегда точно можно судить о полном выздоровлении больного, поскольку наличие антител в организме остаются еще на долгое время.

Преимущество данного теста заключается в том, что такой анализ на лямблии позволяет определить острую или хроническую форму инфекции, или же ее остаточные явления, что говорит о том, что инфекция была уничтожена иммунной системой. Данный ИФА тест можно также применить для исследования кала, в котором присутствуют специфические антигены GSA 65 паразитов.

Как подготовиться к анализу

Анализ на антитела к антигенам  лямблий назначается только лечащим врачом, вдобавок в направлении должна указываться группа иммуноглобулинов (антител) для которых проводится анализ. Кровь надо сдавать утром натощак, предварительно принять все необходимые меры: за 12 часов до сдачи анализа исключить употребление чая и кофе, алкоголя или сока, пить можно только чистую воду. Пробу крови берут из вены, а результат будет готов примерно через три дня.

Как расшифровать результаты ИФА теста

Следует заметить, что результат полученного анализа крови расшифровывает исключительно специалист. Поскольку в таком анализе указываются несколько видов антител, отвечающих за стадийность развития заболевания.

Положительным результатом является следующая маркировка >1 ОПд, которая свидетельствует, что в организме присутствует протозойная инвазия кишечника или же инфекция существовала в прошлом.

Цифры меньше 0,85 ОПд говорят об отрицательном результате, что позволяет с большой вероятностью предположить отсутствие паразитов в организме.

Показатели между интервалом от 0,85 до 1 ОПд предполагают повторный анализ, поскольку картина инфицирования не ясна. В этом случае требуются дополнительные  исследования на лямблии: анализ кала и исследование дуоденального сока.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

Суть метода основывается на молекулярной биологии. Для проведения исследования многократно копируют фрагменты РНК и ДНК лямблий, которые находятся в исследуемом биологическом материале (крови). Затем специалисты сравнивают фрагменты и выявляют тип возбудителя и его количество в организме.

ПЦР – тест проводят в амплификаторе – специальном приборе, который охлаждает и в то же время нагревает пробирки с биоматериалом. Эти манипуляции необходимы для того, чтобы осуществить репликации ДНК и РНК. Точность температурных показателей влияет на достоверность результата.

Данный метод обладает очень высокой информативностью. Он позволяет обнаружить паразитов даже в том случае, когда в пробе оказывается всего одна-единственная молекула его ДНК. Именно данный факт позволил стать ПЦР тесту одним из эффективнейших методов диагностики.

Подготовка к ПЦР тесту

Подготовка к тесту зависит от того, какой биологический материал будет исследоваться. В случае выявления лямблий используют кровь. Кровь сдается утром натощак, в лабораторных условиях, в стерильную пробирку.

Расшифровка результатов

Результат ПЦР-анализа может быть либо положительным, либо отрицательным. Если результат отрицательный – это означает, что в организме лямблии не присутствуют и человек здоров. Положительный результат свидетельствует о присутствии сегментов чужеродных ДНК в крови человека, и говорят об его инфицировании.

Данное исследование может дать положительный результат на самой ранней стадии заболевания, когда больной не ощущает никаких признаков болезни. Многие пациенты склоняются к ошибочной трактовки результатов исследования. Однако ошибке никакой нет. Просто лямблиоз сам по себе может протекать бессимптомно или же болезнь находится на первом этапе заболевания. Как лечить лямблиоз и лечить ли его вообще, определяет только грамотный специалист. Как правило, терапевтические меры применяются только тогда, когда болезнь проявляется симптоматически.

Исследование дуоденальной жидкости

Поскольку лямблии паразитируют не только в тонком кишечнике, а еще в двенадцатиперстной кишке, то дуоденальный сок может быть достаточно информативным материалом для исследования. Если анализ на лямблии кала вызывает некоторые сомнения, то исследование  непосредственного содержимого двенадцатиперстной кишки может обнаружить  этих простейших паразитов.

Для этого делается фиброгастроскопия. Для того чтобы процедура прошла с набольшим комфортом, необходимо тщательно подготовиться к ней:

• за три дня до предполагаемого исследования необходимо отказаться от острой, жаренной, пряной пищи, следует избегать продукты, которые способствуют чрезмерному газообразованию;
• за день до процедуры употреблять легкую пищу;
• за 8 часов да исследования нельзя ничего есть и пить;
• также за три дня до процедуры следует воздержаться от курения и алкоголя, поскольку курение способно стимулировать секрецию желудочного сока, из-за чего и так малоприятная процедура может стать еще дольше;
• если пациент употребляет каждый день определенные препараты, то прерывать лечение нельзя, но дополнительно следует посоветоваться с лечащим врачом;
• процедура длиться не более 20 минут.

Исследование дуоденальной жидкости позволит выявить  локализацию лямблий в организме, что упростить лечение лямблиоза.